AAV Helper-Free System系统简介

2017-9-14 16:19| 发布者: admin| 查看: 310| 评论: 0

摘要:   AAV是一种复制缺陷型微小病毒,其增殖复制需要腺病毒或疱疹病毒的辅助。 AAV无辅助病毒系统(AAV Helper-Free System)可以在无辅助病毒的条件下生产出 重组腺相关病毒。在AAV Helper-Free System 中,生产具有感 ...

  AAV是一种复制缺陷型微小病毒,其增殖复制需要腺病毒或疱疹病毒的辅助。 AAV无辅助病毒系统(AAV Helper-Free System)可以在无辅助病毒的条件下生产出 重组腺相关病毒。在AAV Helper-Free System 中,生产具有感染性的AAV 病毒颗粒所 需的腺病毒基因产物(如:E2A,E4 等基因)大部分由pHelper 质粒提供,其余的腺 病毒基因产物由稳定表达腺病毒E1基因的AAV-293宿主细胞提供。AAV-293细胞是 HEK293细胞经过改良腺相关病毒生产能力而衍生出的亚克隆细胞系。

  野生型AAV 基 因组由病毒rep 和cap 基因(分别编码AAV复制和包装相关的基因)及位于两侧的表 达和包装必须的顺式作用元件——反向末端重复序列(Inverted Terminal Repeats, ITRs)组成。在AAV Helper-Free System中,rep 和cap 基因从病毒载体中被转移到辅 助质粒pAAV-RC 中,AAV ITRs 仍位于病毒载体中。在辅助质粒的帮助下,仅需两端 的ITR 就能将携带的外源片段包装进入腺相关病毒颗粒,因此,rep 和cap 基因的转移 后空出的位置是允许外源基因插入病毒基因组中的最大限度。由于不再需要活的辅助 病毒,AAV Helper-Free System 提供一个更安全,更便利的替代逆转录病毒和腺病毒 的基因传递系统。

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